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細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程
2023-03-02
細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程儀器與試劑儀器試劑耗材離心機(jī)胎牛血清(FBS)離心管(15ml、50ml)生物安全柜無(wú)菌1×PBSpH=7.2T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶電動(dòng)移液器0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA一次性無(wú)菌移液管(2ml、5ml、10ml)CO2培養(yǎng)箱wan全培養(yǎng)基(含血清)1.8mL凍存管倒置顯微鏡液氮罐凍存液:90%FBS+10%DMSO異丙醇程序降溫盒恒溫水浴鍋超低溫冰箱護(hù)目鏡、厚毛線手套等操作流程復(fù)蘇1)將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃;2)準(zhǔn)備一支15ml離心...
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菌種培養(yǎng)過(guò)程中需要注意哪些
2023-02-08
菌種保存條件:斜面、穿刺菌和凍干粉應(yīng)在4-10度保存,甘油菌在-80度保存。菌種培養(yǎng)條件:模式菌株:是培養(yǎng)溫度:37℃培養(yǎng)時(shí)間:24-48h需氧類型:5%二氧化碳生物安全級(jí)別:二級(jí)菌種培養(yǎng)注意事項(xiàng):1、微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;2、菌種操作在無(wú)菌條件下進(jìn)行,接種完畢應(yīng)該滅菌再做丟棄處理;3、斜面菌種和穿刺菌種保存時(shí)間通常為3-6個(gè)月,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)結(jié)轉(zhuǎn);凍干粉保存時(shí)間通常是2-25年;甘油菌保存時(shí)間為2-5年;4、凍干首-次...
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何為PCR技術(shù)?
2023-01-06
PCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCR)是由美國(guó)PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))建立的。這項(xiàng)技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時(shí)反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),而且在DNA重組與表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測(cè)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DN...
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核酸定量檢測(cè)試劑盒具體的操作步驟
2023-01-03
核酸定量檢測(cè)試劑盒反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速;具有使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,大程度地避免了非特異擴(kuò)增;抗干擾的能力強(qiáng),即使是血液、腫瘤、菌落等復(fù)雜樣本,也能獲得較為理想的結(jié)果等特點(diǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光檢測(cè)的特點(diǎn)是設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便、分析速度快及靈敏度高?;瘜W(xué)發(fā)光成像分析是將化學(xué)發(fā)光與成像技術(shù)相結(jié)合,從而具有分辨率高、多樣品同時(shí)檢測(cè)、光譜響應(yīng)范圍寬以及靈敏度高等特點(diǎn)。已廣泛應(yīng)用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學(xué)發(fā)光信號(hào)檢測(cè)。核酸定量檢測(cè)試劑盒具體的操作步驟:1....
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為了確保α干擾素elisa試劑盒正確使用,需要留意這些事項(xiàng)
2022-12-20
a干擾素是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,是機(jī)體受到病毒感染時(shí),免疫細(xì)胞通過(guò)抗病毒應(yīng)答反應(yīng)而產(chǎn)生的一組結(jié)構(gòu)類似、功能接近的低分子糖蛋白。干擾素在機(jī)體的免疫系統(tǒng)中起著非常重要的作用。α干擾素elisa試劑盒操作技巧:1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,...
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熒光PCR檢測(cè)試劑盒使用操作流程介紹
2022-12-13
熒光PCR檢測(cè)試劑盒采用熒光PCR技術(shù),通過(guò)熒光信號(hào)的變化檢測(cè)病毒的基因保守序列。該試劑盒適用于多種樣本(如動(dòng)物肉組織、臟器、組織滲出液、全血或血清、尿液、糞便等)中病毒特異性基因的檢測(cè)。熒光PCR檢測(cè)試劑盒具有下列特點(diǎn):1.即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。2.引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。3.提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。4.特異性高,引物是根據(jù)人副流感病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。5.本產(chǎn)品只能用于科研。...
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如何更好的使用質(zhì)粒小提中量試劑盒
2022-12-10
用質(zhì)粒小提中量試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、測(cè)序、連接、轉(zhuǎn)化、文庫(kù)篩選、體外翻譯、轉(zhuǎn)染一些常規(guī)的傳代細(xì)胞等。儲(chǔ)存條件:該試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。第一次使用前將RNaseA加入溶液P1中,混勻后置于2-8℃保存,可穩(wěn)定保存12個(gè)月以上。單獨(dú)包裝的RNase...
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細(xì)胞專用培養(yǎng)基的選購(gòu)建議有哪些?
2022-12-05
細(xì)胞專用培養(yǎng)基是一種最基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基,但因其營(yíng)養(yǎng)成分所限,針對(duì)生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時(shí),并不一定是使用效果佳或者經(jīng)濟(jì)的培養(yǎng)基。是指供細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖的,由不同物質(zhì)配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。細(xì)胞培養(yǎng)基通過(guò)模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,使得細(xì)胞可以在體外繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖,并維持其結(jié)構(gòu)和功能。細(xì)胞專用培養(yǎng)基的選購(gòu)建議:1、建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞選的培養(yǎng)基。2、其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試,許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。3、根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)的需要來(lái)選擇培養(yǎng)基。4...